外生殖器部位皮肤肿瘤临床病理和HPV感染的相关性
文章导读:人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一种环状、封闭、双链小DNA病毒,病毒颗粒直径约43—55nm,由72个病毒壳粒包被,具有强烈的嗜上皮性,可以引起被感染细胞的显着增殖甚至恶性转化。大量研究表明,许多上皮增生性病变及恶性肿瘤的发生与HPV感染有关。 |
1.4 PCR法检测标本中HPV DNA
PCR体系包括2.5U TaqDNA聚合酶,5μL样品DNA,引物MY09/MY11各0.5μmol/L,dNTP各0.2nmol/L和PCR缓冲液。共35个循环,变性94℃45s,退火52℃1min,延伸72℃1min。HPv L1片段质粒作阳性对照,去离子水代替样品作阴性对照。
1.5 限制性片段长度多态性(RFLP)方法分析PCR产物
限制性内切酶Rsa I、HaeⅢ及Pst I对PCR产物进行酶切反应,反应体系包括0.5μL内切酶,0.1%BSA0.2μL,10μLPCR产物。37℃温育1h。终止反应后2%琼脂糖凝胶电泳观察酶切产物。根据酶切电泳图形对HPV分型。
2 结果
2.1 HPV DNA检测结果
89例外生殖器皮肤肿瘤标本经PCR扩增,34例得到约450bp产物,为HPV L1区一段保守序列,其中鲍温样丘疹病22例,鲍温病5例,Queyrat增殖性红斑2例,5例外生殖器部位浸润性鳞状细胞癌。内参扩增β-珠蛋白基因得到约262bp的产物,表明DNA模板质量和PCR反应体系稳定。
2.2 HPV DNA分型结果
RFLP分析结果表明,34例PCR扩增HPV DNA阳性产物中,31例为HPV16,占91.2%;1例HPV31,占2.9%;2例HPV6合并HPV16阳性,占5.9%。
2.3 病变组织中HPV DNA的检测和分型结果
鲍温样丘疹病40例,其中22例为HPV DNA阳性,20例为HPV16阳性,1例为HPV31阳性,1例为HPV6合并HPV16阳性。鲍温病5例均阳性,其中4例为HPV16阳性,1例为HPV6合并HPV16阳性。Queyrat增殖性红斑6例中2例HPVDNA阳性,均为HPV16。18例外生殖器部位鳞状细胞癌中5例HPVDNA阳性,均为HPV16。20例外生殖器部位的乳房外Paget病患者,HPVDNA均为阴性。
3 讨论
人乳头瘤病毒(human papillomaviruses,HPV)是一种感染皮肤和黏膜鳞状上皮细胞的病毒,可以引起被感染细胞的过度增殖及恶性转化。不同亚型的HPV生物学活性不同,可引起不同的临床和病理表现。高危型HPV(16,18等)多引起鳞状上皮的恶性增殖,低危型HPV(6,11等)主要形成局部鳞状上皮的良性增生。研究表明,HPV感染与肛门生殖器部位皮肤肿瘤的发生有密切关系。
鲍温样丘疹病、鲍温病、Queyrat增殖性红斑病理表现均为表皮原位癌,后两者在临床上更具发展为浸润性鳞状细胞癌的潜能。目前研究表明其发病与高危型HPV感染有关。
本组检测40例鲍温样丘疹病,HPV DNA的阳性率为55%,主要为HPV16感染(90.9%),表明HPV16感染与鲍温样丘疹病的发病密切相关。
鲍温病亦为表皮内原位鳞癌,除发生于外生殖器部位还可发生于躯干、四肢。本组5例外生殖器部位鲍温病HPV DNA阳性率为100%,主要为HPV16感染(80%),表明HPV16感染与生殖器部位鲍温病的发病也密切相关。