亚临床型生殖器疱疹脱排病毒及药物干预的临床研究
文章导读:收集亚临床型生殖器疱疹患者580例,分别用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitation polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测亚临床型生殖器疱疹患者体内血清抗体(HSV-I IgG、IgM及HSV-II IgG、IgM)的分泌情况,分析比较患者不同病程、不同复发频率和有无抗体产生等多种状态下及药物干预后HSV病毒脱排情况。结果:入选的580例患者中,排毒阳性299例(51.6%),DNA质粒数为81-9.9×103copies/ml,平均3.8×103copies/ml。病程超过3年的患者与小于3年的患者比较,排毒阳性率的差异有统计学意义。频发患者(每年复发频率大于6次)与少发患者比较,差异有显著的统计学意义。血清抗体阳性组HSV脱排病毒阳性率明显低于血清抗体阴性组,差异有显著的统计学意义。对299例排毒阳性患者进行药物干预,盐酸伐昔洛韦片(A组)、阿昔洛韦咀嚼片(B组)与对照组比较均有显著性差异,停药后与对照组比较无统计学意义。 |
单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV-1、HSV-2)感染泌尿生殖器皮肤黏膜等部位导致生殖器疱疹(genital herpes,GH)的发生,这是一种易反复发作、难治愈的性传播疾病(sexually transmitted disease,STD),事实上已成为感染后终身性疾病。临床上分为原发性GH、复发性GH、亚临床型GH,HSV分为1型和2型,大多数GH由HSV-2引起,近年来发现HSV-1或两型混合感染者也占有相当大比例。亚临床型皮损不典型或无明显自觉症状,最易被忽略,但仍存在间歇性脱排病毒,是目前生殖器疱疹主要传染源。近年的统计发现,GH发病率逐年增高,女性生殖器疱疹患者存在宫颈癌以及胎儿致畸高风险,且HSV- II还能增加HIV的感染率。GH发病率高、潜伏性、易复发、难治愈,危害之大,已成为全世界共同面临的健康问题,目前虽对其发病机制取得一定研究进展,但仍未有彻底的治疗方法,因此有效预防和控制HSV感染显得极为重要。本实验选取2004年6月至2011年12月期间我科门诊收治的580例患者,试图分析比较不同病程、不同复发频率以及有无抗体产生等多种状态下及药物干预后患者HSV病毒脱排情况,寻找亚临床型GH无症状排毒的可能影响因素,为临床上指导更佳治疗时机、有效减少HSV脱排、预防HSV感染及优生优育等提供更多的理论依据。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 随机收集我科门诊亚临床型生殖器疱疹患者580例,其中男性321例,女性259例,平均年龄33岁(18~57岁)。其中病程超过3年者230例,病程不足3年者350例;频发者(每年复发频率大于6次)302例,少发者(每年复发频率小于6次)278例。经病毒检测,排毒阳性者299例进行药物抑制排毒。
1.1.2 入选条件 所选病例符合以下三条之一:①既往有过生殖器疱疹典型皮损病史,期间未曾进行生殖器疱疹病毒血清学检测,但目前无典型的皮损,无刺痛、灼热、痒感等自觉症状的人群,即处于GH亚临床期。②既往已经确诊为生殖器疱疹的患者,但目前没有典型的皮损等临床症状或者仅仅只有少许刺痛、灼热、痒感等轻微的自觉症状的人群,即处于GH亚临床期。③少数患者因其性伴侣有生殖器疱疹的性病感染史,主动要求进行HSV血清学检查的人群。
1.1.3 排除标准 妊娠期及哺乳期妇女、高血压患者、严重免疫功能低下者、肝肾功能不全者、近3个月内曾接受过各种免疫治疗者、有自身免疫性疾病者、合并其他感染及性传播疾病者。
1.2 方法
1.2.1 取材方法 对每一男性患者,自生殖器部位如龟头、包皮、阴茎皮肤至根部、尿道黏膜上皮及肛周的皮肤黏膜,及少数生殖器外患过皮损的部位采集送检;对每一女性患者,在窥器帮助下用无菌棉拭子采集宫颈上皮,并采集外生殖器等原皮损处,一并送检。
1.2.2 血清学抗体检测和病毒检测 ①血清学抗体检测及分型:抽取静脉血2ml,离心取血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析方法测定HSV-I、HSV-II IgM和IgG。用HSV-II gD2糖蛋白做抗原检测HSV-II抗体,用HSV-II gD1或gC糖蛋白做抗原检测HSV-I抗体。严格按照试剂说明书操作(美国ENE公司出品,由广州泽川医疗器械公司等提供),设置标准对照及阳性与阴性对照,用Therm.MK3(产自上海)的酶标仪于分光光度计测得的吸光值为45Onm波长处读取结果,与临界值比较得出结果。所测标本的OD值比=样品液OD值/校正液OD值,生殖器疱疹患者无症状脱排HSV病毒检测排毒检测的判读标准:只有当所测的OD值比等于7.1时才将结果定为阳性,其余结果均定为阴性。②HSV-DNA检测:采用单纯疱疹病毒核酸检测试剂盒(为HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型共同引物,没有型特异性)以及新型的MJ2型荧光定量PCR检测仪,检测生殖器疱疹患者无症状脱排HSV病毒的排毒情况(包括排毒率、排毒质粒数和不同病程、不同复发频率的生殖器疱疹患者无症状排毒阳性情况)。整个操作过程严格按照试剂说明书操作。通过检测仪读取的实验结果减去正常对照值(1000copies/ml)即为排毒质粒数。
1.2.3 药物干预及观察 排毒检测阳性患者共约299例,分为三个组。治疗组A:127例,服用盐酸伐昔洛韦片,0.3g,2次/d(部分患者2周后自动改为1次/d),共服6个月;治疗组B:127例,服用阿昔洛韦咀嚼片,0.4g,3次/d,共服6个月;对照组:45例,不服用任何药物。分别于服药后第5d、第10d、第4个月和第6个月及完全停药后1个月、4个月和6个月检测治疗组(A、B)无症状脱排HSV-DNA的情况,同时检测对照组。
1.2.4 统计学方法 采用统计软件SPSS17.0软件系统进行数据统计分析。所得实验数据用均数±标准差(x±s )表示,应用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为有显著性的差异。
2 结果
2.1 HSV脱排病毒检测
排毒质粒数:亚临床型生殖器疱疹患者580例,其中排毒检测阳性为299例(51.6%),HSV-DNA质粒数为81-9.9×103copies/ml,平均3.8×103copies/ml。其中男性排毒阳性率为56.4%,女性为45.6% (281例排毒检测阴性患者DNA质粒数检测均为0)。
2.2 不同病程、不同复发频率、不同血清抗体存在等多种状态下亚临床型GH患者HSV脱排病毒阳性率比较
2.2.1 不同病程、不同复发频率患者比较病程超过3年的患者与小于3年的患者排毒阳性率比较,χ2=6.7271,P=0.0095<0.01,差异有显著的统计学意义;频发患者与少发患者比较,χ2=11.4140,P=0.0007<0.01,差异有显著的统计学意义。其中病程小于3年的患者中,频发与少发比较,χ2=6.2550,P=0.0124<0.05,差异有统计学意义;病程超过3年的患者中,频发与少发比较,χ2=3.3374,P=0.0677>0.05,差异无统计学意义。
2.2.2 不同抗体存在情况下患者排毒情况比较亚临床型生殖器疱疹患者580例,血清抗体阳性率为78.3%(454/580),其中血清抗体阳性组HSV脱排病毒阳性率明显低于血清抗体阴性组,差异有显著的统计学意义(χ2=37.8977,P=0.0000<0.01)。排毒阳性组中,HSV-I IgG和HSV-II IgG双阳性组、HSV- II IgG组分别与 HSV-II IgM组比较,差异均有统计学意义(χ2=15.4026,P=0.0001<0.01与χ2= 27.1880,P=0.0000<0.01),而两者之间差异无统计学意义(χ2=1.8405,P=0.1749>0.05)。
2.3 药物干预
对299例排毒阳性患者进行药物干预,治疗组A、B与对照组比较均有显著性差异(P<0.01),停药后与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。伐昔洛韦抑制GH排毒比阿昔洛韦稍强,但二者比较没有统计学差异(P>0.05)。
3 讨论
临床上典型的GH皮损可表现为特征性的水疱、脓疱、溃疡,但表现不典型、无明显自觉症状的亚临床型GH相当多见,且易因对生殖器部位微小裂隙、溃疡缺乏认识而被忽略,但仍存在无症状周期性脱排病毒现象,即无症状HSV脱排病毒(Asymotomatic Shedding)。它是指临床上没有典型GH皮损的患者生殖器部位检测到HSV\。目前,GH的主要传染源是亚临床型生殖器疱疹无症状患者,但其具体排毒的百分率、病毒体脱排的质粒数及相关影响因素尚未见大宗报道。
本研究的580例亚临床型生殖器疱疹无症状患者中,排毒阳性率高达51.6%,排毒质粒数跨度大,在81-9.9×103copies/ml之间,平均为3.8×103copies/ml。此结果高于国外学者Tata S等最新检测无症状排毒总阳性率30.5%,提示患者无症状排毒的个体差异性较大,推测为这可能与入选患者平均年龄较大、免疫力低下、地域差异及试验检测误差等有关。
行血清抗体检测并分型,结果显示:亚临床型GH血清抗体阳性患者HSV脱排阳性率明显低于血清抗体阴性组,提示GH血清抗体的产生对限制HSV复制有一定作用,能有效减少排毒及复发。血清抗体阳性说明患者发生过HSV显性或隐性感染。型特异性血清抗体检测是发现亚临床型GH的可行方法。临床上,型特异性HSV-II抗体阳性常提示生殖器疱疹感染,而仅HSV-I抗体阳性、无明显症状者,很难区分是生殖器部位感染还是口唇或皮肤感染。因而我们不主张对普通人群行HSV血清型特异性筛查,以下情况下可作为GH临床辅助诊断:(1)GH症状反复复发或症状不典型而HSV培养阴性;(2)临床诊断生殖器溃疡而缺乏实验室检查证实;(3)性伴侣确诊为GH。本研究结果血清抗体阳性检测率为44.5%,这可能是因为患者免疫方面等因素,未形成特异性抗体,所以无法检出。这与试验结果中排毒阳性率高达51.6%,排毒质粒数跨度大等结果相吻合。本研究还表明,HSV的杀抑效应不但需要机体细胞免疫和多种免疫因子等的协同作用,而且HSV抗体阳性也有一定的作用,此观点鲜见报道。
从本研究结果中,我们可以初步得出结论:亚临床型GH患者无症状排毒阳性率与病程长短、复发频率、抗体的有无及抗体类别有关;病程越长者、复发频率越少者、血清中存在相关抗体者,检测其排毒阳性率越低,此时患者的传染性越小。此观点目前未见类似报道,这对于减少和控制疾病传播有重要的临床指导意义,有利于优生优育。但是,患者具体排毒周期及相关影响因素均有待于进一步研究。HSV感染后潜伏至神经根,在一定条件如应激、疲劳、免疫力低下等情况下,潜伏病毒被激活复发,因此,规律的生活方式,适当的体育锻炼,良好的心理状态和避免诱发因素均能够有效地减少和预防复发。
药物干预方面,在盐酸伐昔洛韦片(治疗A组)和阿昔洛韦咀嚼片(治疗B组)各127例中,两组自第5天后即可有一定的抑制排毒效应,用药干预4、6个月后已具有明显的有抑制排毒作用,但在停药1个月后又具有明显的排毒作用。检测药物干预治疗前后HSV脱排病毒情况,我们可以得出:规律的抗病毒治疗可以有效的抑制排毒效应,但在停药后很快又开始脱排病毒,且随着停药时间的延长,排毒阳性率明显增加,差异有显著的统计学意义。另外,从治疗A、治疗B两组的疗效结果,我们可以看到,抗病毒药物的选择并没有明显差异,患者可根据药物敏感性、耐受性及自身经济情况来选择。在药物干预期间,两治疗组患者仅有轻度恶心、胃灼不适感,血常规、肝、肾功能等均未发现异常,显示出良好的药物依从性和耐受性。而对照组少数患者在实验期间出现局部痒痛等不典型症状。此结果为指导临床上预防和治疗生殖器疱疹用药,提供了一定的理论依据。
GH目前尚无根治方法,多数学者主张长期抗病毒抑制治疗,虽然能够明显抑制排毒效应,但停药后极易复发,且尚无统一的标准治疗方案。然而,无论是抗病毒治疗或者联合免疫调节剂,都不能彻底消除病毒而达到治愈效果。目前,国内外研究的热点是疫苗的研制,由于疫苗的效用和安全性问题,研制成功的疫苗用于彻底防治HSV感染还有很长的路要走。
来自《中国性科学》杂志 转载请注明出处