5种梅毒血清学检测方法的临床适用性分析
文章导读:收集确诊为梅毒阳性患者的386例血清标本,以及264份来自健康者的血清标本,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)对阳性血清及健康者血清标本进行检测。结果:ELISA和TPPA法的敏感性较高,分别为97.67%和97.41%,两者相比差异无统计学意义(χ2=1.124,P>0.05);ELISA和TPPA法的敏感性均高于TRUST 和RPR法(P<0.05); TPHA的敏感性略小于ELISA和TPPA,与两者相比差异无统计学意义(χ2=1.012、0.947,P>0.05);5种血清学检测方法彼此的特异性差异均无统计学意义(P>0.05)。 |
梅毒是由梅毒螺旋体(TP)感染引发的慢性全身性性传播疾病,其传播能力强、危害性大、病程长,临床表现呈复杂性及多样性,可引起人体所有器官的损害和病变,早期主要感染皮肤或黏膜组织,晚期可导致血管及中枢神经系统病变,严重者可导致死亡。因此,梅毒的早期诊断和及早治疗非常重要。梅毒的主要有血清学、视野检查等方法,目前血清学检查已经成为诊断梅毒的重要依据。血清学检测方法主要有两类:一类为特异性梅毒螺旋体抗体检测,如TP-ELISA、TPPA、TPHA、ABS、FTA等;另一类为非特异性梅毒螺旋体抗体检测,如VDRL、USR、RPR、TRUST等。本研究选择了常用的5种梅毒血清检测方法,探讨了其临床适用性,现报告如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象
我院2011年1月至2013年12月确诊为梅毒阳性患者的386例血清标本,患者中男213例,女173例;年龄4~68岁,平均年龄(31.2±10.2)岁。均按照卫生部卫生行业标准《梅毒诊断标准》(WS273-2007),患者均有性接触史或性伴感染史,有一、二、三期梅毒及隐性梅毒临床表现,并经实验室检查确诊。386例患者中一期梅毒128例,二期梅毒176例,三期梅毒42例,隐性梅毒40例。264份来自健康者的血清标本均来自同期我院健康体检者,检查梅毒、艾滋病病毒和甲、乙、丙型肝炎均为阴性。
1.2 方法
ELISA检测试剂购自厦门创新科技有限公司,TRUST和RPR检测试剂盒均购自上海荣盛生物技术有限公司,TPPA和TPHA检测试剂盒均由日本富士株式会社提供。具体检测步骤严格依据试剂盒说明书,结果的判断依据试剂盒规定标准。仪器设备主要为芬兰产Multiskan MK3 酶标仪和Wellwash Plus 洗板机,上海手术器械厂产0408-2型离心机,上海跃进医疗器械一厂产梅毒振荡仪。
1.3 统计学分析
应用SPSS19.0软件,各种方法敏感性及特异性的比较采用χ2检验,α=0.05。
2 结果
2.1 5种血清学检测方法检测结果
2.2 5种血清学检测方法敏感性、特异性、阳性预测值、隐性预测值ELISA和TPPA法的敏感性较高,分别为97.67%和97.41%,两者相比差异无统计学意义(χ2=1.124,P>0.05);ELISA和TPPA法的敏感性均高于TRUST 和RPR法(P<0.05); TPHA的敏感性略小于ELISA和TPPA,与两者相比差异无统计学意义(χ2=1.012、0.947,P>0.05);5种血清学检测方法彼此的特异性及阳性预测值差异均无统计学意义(P>0.05);TRUST 和RPR法的阴性预测值均明显小于其他方法(P<0.05)。
3 讨论
酶联免疫吸附试验(ELISA)是利用基因工程技术合成螺旋体抗原,检测血清中的特异性IgG和IgM抗体,ELISA在各个时期梅毒的检测均有较高的敏感性和特异性,其敏感性可达到98%左右,特异性可达到99%左右。本次研究中,ELISA法的敏感性为97.67%,特异性为98.11%,敏感性明显高于TRUST和RPR(P<0.05),与目前研究报道结果一致。ELISA法检测结果准确,且操作简单,价格适中,适合用于大规模的筛选及临床诊断。但ELISA法存在钩状效应,在2~15℃的低温环境下,ELISA法的检测敏感性会受到一定程度的影响。另外,本次ELISA法检测中,有9例假阴性患者,考虑可能为梅毒感染早期,其血清标本中特异性抗体含量较低,不容易检出。
TPPA和TPHA法使用梅毒螺旋体制成抗原,血清学检测机制与ELISA相似,均有梅毒螺旋体特异性抗体。由于梅毒螺旋体抗体不随着病人病情的发展和治疗而改变,一直存在于机体内,所以TPPA和TPHA对各个时期梅毒的检测也具有较高的稳定性,临床常用于梅毒的确诊试验。WHO推荐用RPR或VDRL法先对血清进行筛选,发现阳性者再经TPPA或TPHA等方法做确诊试验。本研究中,TPPA的敏感性和特异性分别为97.41%和98.48%,TPHA的敏感性和特异性分别为94.56%和97.73%,TPHA的敏感性和特异性略小于TPPA,但差异无统计学意义(P>0.05)。TPPA敏感性较高的原因可能为TPPA螺旋体抗原经过高纯度的纯化,同样面积的明胶颗粒的抗原包被量高于红细胞,但也可能为血球自溶导致TPHA敏感性稍差。郑颖等报道TPHA的敏感性明显小于TPPA(P<0.05),与本研究结果有差异,可能为使用不同的试剂盒有关。另外,TPPA的明胶颗粒经过活化,可保存于4℃较长时间,有效期长,并且操作中无需等待血清吸收,2h即可得到结果,适用性较强。
TRUST和RPR是非特异性梅毒螺旋体抗体血清学检测方法,检测的是血清或血浆中的反应素。TRUST一般在患者硬下疳出现4周后才能检出梅毒螺旋体,对一期梅毒的敏感性较差,本研究中TRUST对一期梅毒的敏感性仅为81.25%。与TRUST不同,RPR一般在软性下疳出现4周后才能检出梅毒螺旋体,在患者接受治疗后,滴度迅速下降,因此,RPR对二、三期梅毒和治疗后患者的检出率较低。因此,TRUST和RPR只能作为梅毒诊断的初筛实验,或者用于疾病严重程度的判断、是否复发或再感染的判断,以及疗效的观察等方面。
综上所述,5种梅毒血清学检测方法在临床上的意义有所不同,ELISA和TPPA法的敏感性和特异性均较好,但TPPA不利于大批量的样本筛查。TRUST和RPR方法较为简单,但敏感性较差。综合考虑安全性、方便性与经济性,建议用ELISA和TRUST(或RPR)进行双筛,结果阳性者再经TPPA进行确诊。
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