酶联免疫吸附试验、梅毒螺旋体颗粒凝集试验及甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检测中的检验效能评价
文章导读:选取274例患者为观察对象,根据有无感染梅毒将其分为两组,其中177例感染梅毒患者为观察组,97例非梅毒患者为对照组,分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)三种常用的不同血清学诊断方法对两组患者进行梅毒螺旋抗体的检测,分别比较三种检测方法检测的梅毒螺旋抗体的阳性例数、敏感性和特异性,并进行分析。结果:在检测梅毒患者血清标本的阳性率方面,ELISA法最高,为98.87%,TRUST法最低,为88.70%,ELISA法与TPPA法比较,差异无统计学意义(P>0.05),TRUST法分别与ELISA法、TPPA法比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);ELISA法、TRUST法、TPPA法检测梅毒患者血清的敏感性分别为98.87%、88.70%、97.18%,特异性分别为98.97%、95.88%、100.00%,阴性预测值分别为97.96%、82.30%、95.10%,阳性预测值分别为99.43%、97.52%、100.00%;ELISA法敏感性和阴性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05);TPPA法特异性和阳性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05);三种血清学检测方法同时显示梅毒患者血清阳性者有155例,同时显示阴性者有1例,TRUST法显示阴性而TPPA法和ELISA法显示阳性者17例。 |
梅毒作为一种慢性全身性性传播疾病,是由梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)引起的,且梅毒的发病率近年来呈现逐年升高趋势。为筛选有效的梅毒抗体检测试剂,本文中我们就酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)三种常用的不同血清学诊断方法对梅毒螺旋抗体的检测效果进行研究,总结报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月至2014年7月于我科门诊就诊的274例患者为观察对象,其中男性159例,女性115例,年龄8个月~67岁,平均年龄(41.2±6.8)岁;根据有无感染梅毒将其分为两组,其中177例感染梅毒患者为观察组,所有感染患者的血液及脑脊液VDRL及FTA-ABS试验呈阳性反应,97例非梅毒患者为对照组;其中观察组男性106例,女性71例,年龄8个月~66岁,平均年龄(41.7±6.3)岁,I期梅毒94例,II期梅毒58例,III期梅毒25例,既往感染梅毒者51例;对照组男性53例,女性44例,年龄9个月~67岁,平均年龄(41.1±6.9)岁。
1.2 方法
采集患者空腹静脉血5mL,自然收缩后分离血清,按照试剂盒说明书进行梅毒螺旋抗体检测的操作,样品OD值S/C.O≥1者为梅毒抗体阳性;样品OD值S/C.O<1者为梅毒抗体阴性;所有标本同时使用ELISA法、TPPA法、TRUSR法(对血清进行作原倍、1∶2、1∶4、1∶8稀释)进行梅毒血清筛查,结果肉眼清晰可见,严格按照《全国临床检验操作规程》对结果进行判定并详细记录。
1.3 试剂与仪器
主要仪器使用选择芬兰雷勃全自动酶免疫分析仪器(芬兰雷勃公司生产,型号:Multiskans MK3)、梅毒螺旋振荡器(湖北姜堰市新康医疗器械有限公司生产)、全自动酶标洗板机(上海新波生物技术有限公司生产),低速自动平衡离心机(上海安亭科学仪器厂生产,型号:TDL-5-A)。分别选择在有效期内的合格的试剂产品进行检测,有ELISA试剂盒(珠海丽珠试剂股份有限公司生产,批号:20121207)、TPPA试剂盒(日本富士瑞必欧株式会社生产,生产批号:20130105)、TRUSR试剂盒(上海荣盛生物有限公司生产,生产批号:20121127)。
1.4 统计学处理
选用SPSS17.0统计学软件,计量资料采用t检验,组间比较采用配对t检验,计数资料应用χ2检验,P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 三种不同血清学方法检测梅毒患者血清阳性率情况比较
在检测梅毒患者血清标本的阳性率方面,ELISA法最高,为98.87%,TRUST法最低,为88.70%,ELISA法与TPPA法比较,差异无统计学意义(P>0.05),TRUST法分别与ELISA法、TPPA法比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。
2.2 三种不同血清学检测方法的检验效能评价
ELISA法、TRUST法、TPPA法三种血清学检测方法检测梅毒患者血清的敏感性分别为98.87%、88.70%、97.18%,特异性分别为98.97%、95.88%、100.00%,阴性预测值分别为97.96%、82.30%、95.10%,阳性预测值分别为99.43%、97.52%、100.00%;ELISA法敏感性和阴性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05);TPPA法特异性和阳性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.3 三种不同血清学检测方法诊断结果一致性情况
三种不同血清学检测方法同时显示梅毒患者血清阳性者有155例,同时显示阴性者有1例,TRUST法显示阴性,而TPPA法和ELISA法显示阳性者17例。
3 讨论
梅毒螺旋抗体有非特异性和特异性两种抗体,加上梅毒在早期临床表现呈现多样性、复杂性,因此对其早期准确诊断意义重大。目前梅毒临床诊断的重要依据是血清学的检测方法,ELISA法和TPPA法是特异性的应用于梅毒实验室筛查的血清学检测方法,而TRUST法为非特异性的梅毒螺旋体血清试验法。
本文研究发现,在检测梅毒患者血清标本的阳性率方面,ELISA法最高为98.87%,TRUST法最低为88.70%,ELISA法与TPPA法比较,差异无统计学意义(P>0.05),TRUST法分别与ELISA法、TPPA法比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),这与李明伟的研究报道相符。究其原因,ELISA血清检测法的灵敏度和特异性均可高达99%以上,由于其操作和检测的自动化,且其受影响因素较少,结果相对准确客观,在本研究中的阳性检测率最高。因此ELISA法常用于处理分析大批量样品的筛查和临床诊断,是首选筛查大批量标本的方法。
此外,ELISA法、TRUST法、TPPA法三种血清学检测方法检测梅毒患者血清,ELISA法敏感性和阴性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05);TPPA法特异性和阳性预测值最高,与TRUST法比较,差异有统计学意义(P<0.05);这与郑伟的研究结论一致。TPPA法可以对梅毒螺旋体抗体效价进行测定,且不受生物因素的影响,特异性好,灵敏度高,目前其作为确证梅毒血清学的试验是公认的;缺点是对结果的评判主观性较高,结果不易实现自动化评价,且价格相对昂贵,成本较高,这限制了其在医院检测应用的广泛性。
本文还发现三种血清学检测方法同时显示梅毒患者血清阳性者有155例,同时显示阴性者有1例,TRUST法显示阴性,而TPPA法和ELISA法显示阳性者17例。TRUST法相对其他检测方法较为稳定,且结果比较清楚而易辨,快速简捷,易出现假阳性是其缺点,所以结合其他方法同时检测时结果可靠性才较大,确认未感染梅毒的方法为两种检测结果均为阴性时才可确定。文献研究认为结合应用以上三种检测方法对临床梅毒诊断符合率的有效提高意义重大,可以对梅毒进行及早诊断和治疗的指导,进而起到对梅毒蔓延的控制作用。
综上所述,三种血清学检测方法的侧重点各不相同,提示ELISA检测法适用于临床大批量样本筛查、TPPA法适用于进行对梅毒确诊、TRUST法应用于对梅毒患者治疗疗效及预后的判断,在临床中应结合实际情况进行选择。
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