荧光PCR和蛋白免疫印迹技术在诊断新生儿先天梅毒中的意义
文章导读:目的:探讨荧光PCR和蛋白免疫印迹技术在诊断新生儿先天梅毒中的运用。方法:对我院收治的50例先天梅毒患儿以及40例正常新生儿进行荧光PCR和蛋白免疫印迹技术在诊断新生儿先天梅毒的敏感度以及特异性研究。结果:荧光PCR其敏感度为98%,特异性为100%,明显高于蛋白免疫印迹的84%以及85%。两种方法比较具有统计学差异性(P<0.05)。结论:荧光PCR在诊断新生儿先天梅毒中较蛋白免疫印迹技术具有更好的敏感性以及特异性,值得在临床中推广。 |
先天梅毒(Congenital syphilis,CS)又被叫做胎传梅毒,其主要是指梅毒螺旋体由母亲经过胎盘直接进入胎儿血液循环,使胎儿感染并使其新生儿、婴儿以及儿童发病的梅毒。CS具有高危险性,给社会以及家庭带来了极大的负担。现阶段研究发现,对先天梅毒患儿早诊断、早干预对患儿的预后极为重要,但对CS的诊断中,对具有典型临床表现的CS容易诊断,但对于潜伏的CS患者进行诊断的难度较大。荧光PCR是由PCR技术中发展出的新技术,具有对基因的扩展的敏感性以及分子杂交的特异性和光化学的精确性等特点。为探究荧光PCR对CS的诊断效果,对我院收治的50例CS患儿采用荧光PCR和蛋白免疫印迹技术进行诊断,现将其报道如下。
1 材料与方法
1.1 临床资料
对于2008年1月-2011年2月在我院产前确诊为梅毒的48例梅毒孕妇作为研究对象,其中有2例为双胞胎,产后或流产后均确诊为CS患儿。同时选取接受梅毒血清学检查为阴性的孕妇39例作为对照组,其中1例为双胞胎。孕妇在产后1-5d内抽取新生儿静脉血检查。诊断标准:孕妇梅毒诊断以及临床分期,根据我国国家梅毒标准诊断以及处理原则进行判断;先天梅毒的诊断标准根据美国疾病控制中心推荐的有关先天梅毒的诊断标准进行判断。两组孕妇在年龄、性别、合并疾病、孕期、产程等均无统计学差异性,本临床研究具有可比性。
1.2 研究方法
所有对象均在严格无菌情况下由专人取生产或引产的全层胎实质、新鲜胎盘胎膜、脐带标本以及产后取新生儿以及产妇静脉血,并取下一段胎盘和脐带制作标本,并将其保存至-20℃冰箱内低温保存。本研究中每月集中进行检查一次,在检查前,常温解冻,并采用梅毒螺旋体特异性抗体免疫印迹试剂盒进行相关诊断。荧光定量聚合酶链反应(TP-FQ-PCR)法根据学者的方法进行相关操作,所有操作以及仪器使用均根据其仪器的使用说明进行实施。
1.3 免疫印迹结果判断
根据学者报道,印迹膜中分子量为1.4万、4.7万以及1.7万等多肽抗原中任意2条出现,可判定其为阳性,而当其出现无色条带,或者分子量为4.5万、2.5万、3.3万、9万、3万、6万以及2.2万等多肽抗原出现弱条带时,将其判断为阴性。荧光PCR的阳性以及阴性由参考文献进行判断。两种方法采用3人进行判断,且均不知其判断者的结果。
1.4 随访
对检测为阳性的患者进行随访,患儿在早期CS的临床表现为全身皮肤褶皱、四肢躯干出现暗红色斑疹、肛周出现扁平湿疣、掌跖脱皮、伴有多脏器衰竭等均可判断其为新生儿先天梅毒。对检测出阳性但无明显临床症状的患儿进行跟踪随访1年,其再次检测为阴性则可排除其为CS的可能。
1.5 统计学分析
采用SPSS15.0进行统计学分析,对计数资料采用卡方检验,对计量资料采用t检验,检验水准设定为a=0.05,当P<0.05时,认为其具有统计学差异性。