收集逆行射精患者尿液中精子用于人工授精
文章导读: |
逆行射精是引起男性不育的原因之一,临床上较为少见,其诊断要点是能正常性交且性交持续时间正常,有射精动作、快感及高潮,但无精液射出,性交后在尿中可查到精子和果糖等。目前,包括人工授精、卵胞浆内单精子注射等多种方法已经成功应用于逆行射精所致男性不育症的治疗,而如何收集逆行射精患者尿液中的精子已经成为这些治疗方法中的一个关键环节。近年来,我们采用密度梯度离心法收集逆行射精患者尿液中的精子用于人工授精,取得了较好的效果,现报告如下。
(逆行射精)
资料与方法
1 临床资料
2008年7月~2010年12月期间在安阳市妇幼保健院男性科和安阳市人民医院泌尿外科因男性不育就诊、经体格检查和彩色多普勒超声检查均无异常发现并符合上述逆行射精诊断要点的患者共5例。这5例患者大致年龄为23~29岁,婚后不育年限为2~8年,其中4例患者否认有外伤、手术史,无服用抗精神病、抗高血压药物史,分析为原发性逆行射精;1例既往曾生育1女婴,后因腰骶部外伤1年后渐续造成性交后无精液射出,分析为继发性逆行射精。5例患者曾在外院断续服用盐酸麻黄素、丙咪嗪、左旋多巴以及中草药等,服用方法和剂量不详,未见明显疗效。
患者配偶大致年龄为21~29岁,妇科B超检查均正常,月经规律,无排卵障碍,子宫输卵管碘油造影提示双侧输卵管通畅,相关免疫抗体检查均为阴性。
2 方法
2.1 试剂的准备取1个一次性无菌圆底试管,加入3mlQ-HTF精子洗液(美国ZDL公司产品)置于37℃、5%CO2培养箱平衡过夜;用G-IVFTM-plus精子处理和受精液(瑞典Vitrolife公司产品)分别稀释SpermGradTM-30精子梯度液(瑞典Vitrolife公司产品)浓度为45%和90%,于授精日当天,用无菌巴士德吸管吸取1ml45%SpermGradTM-30精子梯度液加入到1个一次性无菌尖底离心试管内,再用无菌巴士德吸管吸取1ml90%SpermGradTM-30精子梯度液缓慢加入到45%SpermGradTM-30精子梯度液的下层,然后置于37℃、5%CO2培养箱中备用。
2.2 患者的准备嘱患者戒烟酒及辛辣食物,近期内避免患高热等疾病,排卵期前禁欲5~7天。在女性排卵期前3日开始低蛋白饮食,并服用小苏打片,每日1g,以碱化尿液。授精日,一次性口服小苏打片3g,并嘱患者多喝水,1小时后每30min用精密pH试纸条测试患者尿液酸碱度,直至尿液呈碱性为止。嘱患者排净小便,手淫取精,当有性快感及高潮但无精液射出时,立即排小便于一次性无毒无菌取精杯内。
2.3 收集精子将取精杯内的尿液视量的多少转入1~2个无菌尖底离心试管内,立即以1000rpm的转速离心5min,搜集沉淀物并加入2ml37℃、5%CO2培养箱平衡过的Q-HTF精子洗液充分混匀,镜下观察并记录精子密度、活力及成活率等精子主要参数后再缓慢转入到90%、45%双层SpermGradTM-30精子密度梯度离心液的上层,以1500rpm的转速离心10min,弃上清,向沉淀物内加入数滴Q-HTF精子洗液混匀,使终体积为0.3~0.5ml,即制成密度较高、活力较好的精子悬液,镜下观察并记录上述精子主要参数后放于37℃、5%CO2培养箱中待行人工授精。
2.4 人工授精患者配偶均采用自然周期,B超动态监测卵泡发育以及子宫内膜的厚度,查看宫颈黏液情况,当优势卵泡直径达18mm以上、子宫内膜出现三线征、尿促黄体生成素呈阳性时,适时将收集、处理好的精子进行宫腔内人工授精,术毕抬高臀部仰卧2h。我们一般采用在排卵前做一次人工授精,部分患者在排卵前与排卵后各做一次人工授精。